استخراج حمض الكولاجين

Jul 20, 2022 ترك رسالة

استخراج الحمض هو استخدام تركيز معين من المحلول الحمضي لاستخراج الكولاجين في ظل ظروف معينة ، وذلك باستخدام ظروف حمضية منخفضة التركيز الأيوني بشكل أساسي لتدمير روابط الملح بين الجزيئات وقواعد شيف ، وتسبب انتفاخ الألياف وانحلالها. عادة ما يصبح الكولاجين المستخرج بطريقة الحمض كولاجين قابل للذوبان في الحمض. يمكن لطريقة الذوبان الحمضي إذابة جزيئات الكولاجين دون الارتباط المتبادل ويمكنها أيضًا إذابة ألياف الكولاجين التي تحتوي على روابط الأديمين المتقاطعة ، ثم إطلاقها في المذيب. الطريقة الحمضية هي طريقة شائعة وفعالة نسبيًا لاستخراج الكولاجين. يحافظ الكولاجين المستخرج بطريقة الحمض منخفض الحرارة على هيكله الحلزوني الثلاثي إلى أقصى حد وهو مناسب لتحضير المواد البيولوجية الطبية والمواد الخام. تتمثل الممارسة المعتادة في إضافة تركيز مناسب من المحلول الحمضي إلى وجبة العظام المُعالجة مسبقًا وفقًا لنسبة معينة من المواد إلى السائل مع التقليب والاستخلاص عند درجة 0-25 لفترة معينة. عند استخدام طريقة الحمض لاستخراج الكولاجين ، يجب ملاحظة أن درجة حرارة الاستخلاص يجب ألا تكون عالية جدًا ، وذلك لتجنب تدمير النشاط البيولوجي للكولاجين. بعد أخذ العينات والمعالجة المسبقة ، تم استخلاص المجانسة بالحمض عند درجة حرارة منخفضة وطرده مركزيًا للحصول على الكولاجين القابل للذوبان في الحمض (ASC). تشتمل الأحماض المستخدمة كمذيبات بشكل أساسي على حمض الهيدروكلوريك ، وحمض الفوسفوريك ، وحمض الفورميك ، وحمض الخليك ، وحمض الماليك ، وحمض الستريك ، وما إلى ذلك ، ولكن معظم الدراسات تركز على استخراج حمض الأسيتيك. على سبيل المثال ، ماريا سادوسكا وآخرون. يستخدم 0 .5 مول / لتر حامض الستريك لاستخراج بروتين الكولاجين في درجة حرارة الغرفة ، ومعدل استخلاصه أقل قليلاً من معدل استخلاص حمض الأسيتيك. يستخدم حامض الستريك على نطاق واسع في استخلاص الكولاجين في الصناعات الغذائية لأنه لا ينتج اللون والرائحة.

أثناء المعالجة الحمضية ، يكون التفاعل قويًا ، ويكتمل التحلل المائي ، وينتج خليط الأحماض الأمينية في الغالب. عند استخدام الاستخلاص الحمضي ، اعتمادًا على تركيز الحمض ودرجة حرارة التحلل المائي ووقت التحلل المائي وظروف أخرى ، يمكن الحصول على تحلل الكولاجين بوزن جزيئي غير متساوٍ. ومع ذلك ، سيتم تدمير التربتوفان ، وسيتم أيضًا تدمير السيرين والتيروزين جزئيًا ، وستتآكل المعدات بشكل خطير أثناء التحلل المائي الكامل للتركيز المعتدل للحمض. لذلك ، يجب التحكم بدقة في الحموضة ودرجة الحرارة والوقت والعوامل المؤثرة الأخرى من أجل إذابة الكولاجين الطبي الحيوي بالطريقة الحمضية. بسبب أوجه القصور المختلفة ، نادرًا ما يتم استخدام الطريقة الحمضية بمفردها ، ويتم دمجها عمومًا مع الطريقة الأنزيمية. على سبيل المثال ، باستخدام جلد الخنزير كمادة خام ، يتم استخراج الكولاجين تحت تآزر حامض الستريك (pH8.6) والببسين. أضف 0. 0 5 مليلتر / لتر من محلول حامض الستريك (الرقم الهيدروجيني 2. 5-3) الذي يحتوي على البيبسين إلى جلد الخنزير المعالج لفترة ، ثم الملح مع كلوريد الصوديوم ، وهو معدل الاستخراج النهائي هو 12.35 في المائة ، ويحافظ الخلاصة على ثلاثة خيوط بنية حلزونية من النوع الأول من الكولاجين. استخدم آخرون الغضروف القصي للكتاكيت كمادة خام ، وتم هضمهم مع الببسين لعدة مرات تحت حالة 0.5 ملي لتر / لتر من حمض الأسيتيك ، وطردهم عند 4 درجات و 20000 لفة لمدة 20 دقيقة ، وأخيراً طبقوا DEAE-Sephadex A -50 للتبادل الأيوني الكروماتوغرافيا ، ثم غسيلها ، ثم تمليحها مع كلوريد الصوديوم ، وأخيراً تم الحصول على الكولاجين المنقى من النوع الثاني.



2

إرسال التحقيق

whatsapp

الهاتف

البريد الإلكتروني

التحقيق